Le milieu de Chapman est un milieu sélectif, surtout utilisé en microbiologie médicale, permettant la croissance des germes halophiles. Parmi ces germes figurent au premier rang les bactéries du genre Staphylococcus, mais aussi lesMicrococcus, les Enterococcus, les Bacillus, et de rares bactéries à Gram négatif.
Aspect du milieu avant utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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L'ensemencement doit être massif, en stries serrées ou par inondation
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Ce milieu contient un inhibiteur : fortes concentrations en chlorure de sodium (75 g.L-1), ce qui permet un isolement sélectif de Staphylococcus tolérant les fortes concentrations en NaCl
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On peut étudier la fermentation du mannitol par virage au jaune de l’indicateur coloré, le rouge de phénol, autour des colonies.
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Les colonies mannitol + sont entourées d’une auréole jaune.
Ne pas confondre la pigmentation des colonies et le virage de l’indicateur coloré.
Ainsi des colonies pigmentées en jaunes et mannitol + : forte suspicion de S. aureus
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| Aspect du milieu après utilisation | ||||
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La gélose Hektoen est un milieu d'isolement des Salmonelles et des Shigelles, bien que de nombreuses bactéries à Gram négatif puissent se développer sur ce milieu. L'identification d'entérobactéries pathogènes repose sur la non utilisation des glucides présents dans le milieu.
Aspect du milieu avant utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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L'ensemencement se fait par les techniques habituelles.
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Deux indicateurs sont présents dans le milieu :
- le bleu de bromothymol (indicateur de pH)
- la fuschine acide (qui se colore en présence d'aldéhyde.
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trois types de glucides : la salicine (qui est un hétéroside), le saccharose et le lactose.
La production d'H2S à partir de thiosulfate |
Colonies saumon : Escherichia, Levinea, Citrobacter diversus, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Yersinia
Colonies saumon à centre noir : Citrobacter freundii, Proteus vulgaris,
Colonies bleu-vert à centre noir : Suspicion de Salmonella, à différencier de Proteus mirabilis
Colonies bleu-vert ou vertes : Suspicion de Shigella ou de Salmonella
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| Aspect du milieu après utilisation | ||||
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Gélose Salmonella-Shigella.
Milieu sélectif permettant l’isolement d'entérobactéries pathogènes.
Il est très utilisé pour la recherche de Salmonella dans les selles et les denrées alimentaires peu pour les Shigella car trop sélectif.
Aspect du milieu avant utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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Isolement par la méthode des cadrans.
Incuber 18 à 24 h à 37°C. |
Le milieu contient 3 inhibiteurs :
- sels biliaires,
- vert brillant
- forte concentration en citrate de sodium.
Ceux-ci empêchent la pousse de toutes bactéries Gram+, et rendent difficile la croissance des bactéries Gram- autres que Salmonella et Shigella.
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Le milieu contient du lactose pouvant être fermenté.
Le milieu contient du thiosulfate pouvant donner du H2S.
| colonies rouges : lactose + colonies incolores : lactose– colonies à centre noir : H2S + |
| Aspect du milieu après utilisation | ||||
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Milieu Eosine Bleu de Méthylène.
Milieu d'isolement des bacilles Gram-.
Il est très utilisé pour l’isolement des coliformes.
Aspect du milieu avant utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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Isolement par la méthode des cadrans.
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Ce milieu contient deux colorants, l’éosine et le bleu de méthylène qui inhibent la majeure partie de la flore Gram+ (sauf Streptocoques D). Bien que les Entérobactéries lactose - puissent s’y développer, la culture des Entérobactéries lactose + y est favorisée.
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Le milieu contient un critère de différenciation, le lactose
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colonies violettes : semi-bombées de 2 à 3mm de diamètre avec éclat métallique, centre sombre : E. coli très bombées muqueuses de diamètre 5 mm centra gris marron sans reflet Klebsiella
colonies grisâtres :
- 1 à 2 mm de diamètre transparentes, grises ambrées : Salmonella, Shigella.
- 2 mm de diamètre, grisâtres avec une pellicule autour de la colonie :Proteus morganii
punctiformes et grisâtres : Enterococcus.
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| Aspect du milieu après utilisation | ||||
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Milieu sélectif pour l'isolement des bacilles Gram- Salmonella et Shigella ainsi que des bactéries coliformes dans les eaux, les produits alimentaires, les produits pharmaceutiques et biologiques .
Aspect du milieu avant utilisation
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Aspect du milieu après utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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Isolement par la méthode des cadrans.
Incuber 18 à 24 h à 37 °C.
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Ce milieu contient deux inhibiteurs de la flore Gram+ :
- les sels biliaires
- le cristal violet
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le lactose dont l’utilisation est révélée par l’indicateur coloré du milieu, le rouge neutre.
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colonies rouges entourées d’un hâlo opaque de la même couleur du à la précipitation des sels biliaires: lactose+
colonies jaunes ou incolores : lactose-
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Le milieu CLED (Cystine Lactose Electrolyte Déficient) est un milieu non sélectif, très utilisé dans l'étude des bactéries contenues dans l'urine. Etant un milieu non sélectif de nombreuses bactéries, tant Gram + que Gram -, pourront se développer.
L’absence d’électrolytes (pas de NaCl) limite le phénomène d’envahissement par les Proteus.
Aspect du milieu avant utilisation
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Aspect du milieu après utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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La lecture s'effectue après 18 à 24 heures d'incubation à 37°C.
| Lactose | lactose + apparaissent jaunes lactose – apparaissent bleues vertes |
C’est un milieu utilisé pour la détection et l’isolement des entérobacteriacées dans l’eau, les produits alimentaires, l’urine et les selles
Ce milieu facilite la différenciation des colonies par le caractère lactose. Il inhibe l’envahissement de la surface de la boite par des nappes de Proteus car il ne contient pas d'électrolytes.
C’est un milieu non sélectif qui est utilisé pour l’isolement de nombreuses espèces n’appartenant pas aux entérobactéries.
C’est un milieu contenant une base nutritive ordinaire permettant la pousse des bactéries non exigeantes.
Il contient un critère de différenciation : la fermentation du lactose révélée par le virage en milieu acide de l’indicateur coloré de pH, le bromocrésol pourpre.
Il est déficient en électrolytes : absence d'ions minéraux.
Aspect du milieu avant utilisation
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Aspect du milieu après utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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 |  | Isolement 18 à 24 h à 37°C | - Non selectif - Dépourvu en électrolyte - Bromocrésol pourpre |
- Espèces n’appartenant pas aux entérobactéries
- Fermentation du lactose
| Colonies bleues : bactéries lactose –Colonies jaunes : bactéries lactose + |
Recherche et dénombrement de Staphylococcus aureus
Ce milieu contient une base nutritive riche.
Il contient des accélérateurs de la croissance : le pyruvate de sodium et le glycocolle
Aspect du milieu avant utilisation
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Aspect du milieu après utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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 |  | Isolement 18 à 24 h à 37°C | Il contient 2 inhibiteurs : le chlorure de lithium le tellurite de potassium. | Contient 3 critères de différenciation : réduction du tellurite protéolyse des protéines du jaune d'œuf hydrolyse par une lécithinase des lécithines du jaune d'œuf | - en tellure noir - halo clair autour de la colonie - liseré blanc opaque autour de la colonie |
Milieu d'isolement sélectif des Streptocoques D (entérocoques et non entérocoques).
Aspect du milieu avant utilisation
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Aspect du milieu après utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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Le milieu présenté en boite de Pétri est destiné à un isolement.
Le milieu présenté en tube est à beurrer avec une culture pure car il entre dans la galerie d’identification des coques gram + de culture facile.
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C’est un milieu sélectif des streptocoques peu exigeants.
Il contient 2 inhibiteurs :- la bile de bœuf - l’azide de sodium | l’esculine révélée par le citrate de fer ammoniacal |
Pousse de petites colonies sur le milieu : Streptocoques D
Colonies entourées d'un halo noir : esculine + |
C’est un milieu d’isolement enrichi sur lequel les Streptocoques se développent bien. Il permet, la lecture du caractère hémolytique.
C’est un milieu riche d’autant plus par la présence de sang.
Aspect du milieu avant utilisation
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Aspect du milieu après utilisation
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Mode d’ensemencement
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Caractères recherchés
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Résultats
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 |   | Isolement 18 à 24 h à 37°C | Hémolyse |
Hémolyse b : zone claire d’hémolyse totale de diamètre 3-4 mm entourant les colonies.
Hémolyse a : zone floue et granuleuse, verdâtre de 1 à 2 mm de diamètre
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Milieu de dénombrement des entérocoques en microbiologie alimentaire. Son emploi est surtout réservé aux eaux, après filtration.
Aspect du milieu avant utilisation
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Aspect du milieu après utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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  |   | Isolement Filtration |
Il contient un inhibiteur des gram -, qui sélectionne les Streptocoques : l’azide de sodium.
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le TTC qui lors de sa réduction donne une coloration des bactéries en rouge.
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Les Entérocoques donnent des colonies de taille moyenne, roses ou rouges.
Les Bacillus peuvent pousser et donner le même aspect de colonies, mais de taille plus importante.
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La gélose au cétrimide est un milieu sélectif, qui permet l'isolement des Pseudomonas et notamment de P.aeruginosa. Ce milieu gélosé est relativement pauvre, et contient un antiseptique: le cétrimide (bromure de N-cétyl-N, N, N-triméthylammonium). Ce milieu, proche du milieu King A, favorise aussi la production de pigments par P.aeruginosa.
Aspect du milieu avant utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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Résultats
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Ensemencer la surface du milieu au moyen de l'anse.
Incuber durant 24 heures à 37°C, voire même de préférence à 42°C (l'incubation à 42°C permet un isolement spécifique deP.aeruginosa).
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Sur ce milieu de très nombreuses bactéries sont inhibées de par la présence de l'antiseptique cétrimide(bromure de N-cétyl-N, N, N-triméthylammonium)., ainsi que par la présence de l'antibiotique acide nalidixique (inhibiteur de nombreuses bactéries à Gram négatif).
| -pyoverdine -pyocyanine | Milieu bleu : pyocyanine Milieu jaune- vert : pyoverdine |
| Aspect du milieu après utilisation | ||||
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La gélose de Sabouraud constitue un milieu classique pour la culture, l'isolement et l'identification des levures et des moisissures saprophytes ou pathogènes.
Elle est recommandée essentiellement pour l'isolement des moisissures dans les prélèvements peu chargés en bactéries, les contrôles de stérilité des produits pharmaceutiques, cosmétiques ou alimentaires, la culture des moisissures en vue de réaliser leur identification.
Dans le cas de prélèvements fortement contaminés, il est préférable d'utiliser la gélose Sabouraud + chloramphénicol .
Aspect du milieu avant utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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- Transférer l'échantillon à analyser sur le milieu.
- Etaler l'inoculum en surface à l'aide d'un étaleur en verre stérile.
- Incuber à 20 - 25°C de 3 à 5 jours.
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L'ajout de triphényltétrazolium à raison de 100 mg par litre en fait un milieu de différenciation pour les Candida.
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| Aspect du milieu après utilisation | ||
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Aspect du milieu avant utilisation
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Mode d’ensemencement
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Sélectivité / composition
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Caractères recherchés
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- Transférer l'échantillon à analyser sur le milieu.
- Etaler l'inoculum en surface à l'aide d'un étaleur en verre stérile.
- Incuber à 20-25°C de 3 à 5 jours.
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Chloramphénicol
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Recherche des champignons
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| Aspect du milieu après utilisation | |||
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